date:2025-04-10 16:27:58
趨化性分析旨在分析某一細胞類型是否會直接朝著特定的趨化因子定向遷移。由于趨化性在癌癥發(fā)展和免疫細胞浸潤過程中尤為重要，因此在趨化性分析中常用的細胞類型為癌細胞和免疫細胞。
趨化性分析可用于研究：
·目的基因敲除、敲低或過表達后細胞的趨化行為
·物質(zhì)的趨化潛力
·趨化抑制劑和增強劑的作用
·區(qū)分趨化性和化學誘導運動（增強的細胞遷移）
·趨化過程中的細胞信號傳導
·趨化過程中細胞骨架的變化
在2D表面遷移的HT-1080 LifeAct-TagGFP2趨化性細胞
2D與3D趨化性分析
許多細胞自然生長于3D環(huán)境中。在體外培養(yǎng)時，細胞附著在平坦的2D表面上，其行為可能與處于3D凝膠基質(zhì)中時有所不同。在很多情況下，3D環(huán)境更接近體內(nèi)真實情況，因此在設計趨化性實驗時需要考慮到這一點。
使用µ-Slide Chemotaxis趨化載玻片時，由于凝膠結構不妨礙擴散，可輕松在水基凝膠（如I型膠原凝膠和Matrigel）中建立趨化梯度。
顯微成像示意圖：2D表面貼壁的HT-1080癌細胞（左）
嵌入3D I型膠原凝膠的HT-1080癌細胞（右）
用于趨化性分析的腔室
已經(jīng)開發(fā)了幾種具有不同特性的腔室來進行趨化性分析：
·µ-Slide Chemotaxis趨化載玻片
·Boyden Chamber（Transwell遷移實驗）
·齊格蒙德小室（Zigmond Chamber）
·鄧恩小室（Dunn Chamber）
ibidi µ-Slide Chemotaxis趨化載玻片
·在ibidi µ-Slide Chemotaxis趨化載玻片中，細胞在連接兩個大儲液池的中央通道內(nèi)遷移并可被實時觀察到。
·可建立長期穩(wěn)定的線性梯度
·實驗起始時細胞分布均勻
·適用于倒置顯微鏡活細胞成像
適用于：
·2D和3D分析
·快速和慢速遷移的細胞
·貼壁和非貼壁細胞
實驗原理：細胞可培養(yǎng)于3D凝膠基質(zhì)或2D表面（圖示為3D凝膠中遷移細胞）
µ-Slide Chemotaxis的開發(fā)旨在研究快速或慢速遷移的、非貼壁或貼壁細胞在2D表面或3D凝膠基質(zhì)中的趨化行為。可以在超過48小時的時間內(nèi)觀察到細胞在穩(wěn)定線性濃度分布中的遷移。由于梯度可以快速建立，因此也可以測量快速遷移反應（在不到30分鐘內(nèi)發(fā)生）。
使用µ-Slide Chemotaxis可以對各種細胞類型（如內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、癌細胞和免疫細胞）的遷移行為進行詳細而明確的分析。
參考文獻：
Zengel P, et al. (2011) μ-Slide Chemotaxis: a new chamber for long-term chemotaxis studies. BMC Cell Biol 12:21. 10.1186/1471-2121-12-21.
Biswenger V, et al. (2018) Characterization of EGF-guided MDA-MB-231 cell chemotaxis in vitro using a physiological and highly sensitive assay system. PLoS One 13(9):e0203040. 10.1371/journal.pone.0203040.
Boyden Chamber（Transwell遷移實驗）
·細胞從濾膜或多孔膜的一側(cè)遷移到另一側(cè)，也稱為Transwell細胞遷移分析
·終點分析：在分析Transwell遷移分析時，在膜的背面計數(shù)遷移細胞，因此無法分析細胞路徑
·陡峭的梯度
·起始細胞分布不均；細胞僅位于膜的一側(cè)
Zigmond Chamber
·細胞在連接兩儲液池的橋接區(qū)域玻璃蓋片上遷移生長和遷移
·生成線性梯度但穩(wěn)定性差
·起始細胞分布均勻
·需正置顯微鏡進行延時成像
Dunn Chamber
·與Zigmond腔室相似
·生成線性梯度但穩(wěn)定性差
·起始細胞分布均勻
·需正置顯微鏡進行延時成像
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