date:2022-06-17 14:04:09
您聽(tīng)說(shuō)過(guò)有關(guān)ibidi 聚合物蓋玻片的完整故事嗎？畢竟，它是我們 µ-Slides、µ-Dishes 和 µ-Plates 的核心，在很大程度上促成了我們的成功。
這一切都始于 2000 年代初，當(dāng)時(shí)三名博士生和他們的 PI 有一個(gè)愿景，即成立一家通過(guò)結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡來(lái)徹底改變基于細(xì)胞的分析的公司。到目前為止，細(xì)胞生物學(xué)家不得不在對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有利但對(duì)成像不利（例如，聚苯乙烯制成的組織培養(yǎng)瓶）或?qū)Τ上裼欣珜?duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利（例如，玻璃蓋玻片）的表面之間進(jìn)行折中。
這種困境促使 ibidi 創(chuàng)始人開(kāi)始尋找一種即具有玻璃光學(xué)特性的材料，同時(shí)又能保證良好的細(xì)胞粘附和生長(zhǎng)。他們最終發(fā)現(xiàn)了一種具有出色光學(xué)質(zhì)量的聚合物箔，這就是ibidi 聚合物蓋玻片。它可以粘合到上部結(jié)構(gòu)，這種組合是第一個(gè) ibidi 顯微鏡室。然而，這種特殊的聚合物箔非常疏水，細(xì)胞不會(huì)粘附在上面。幸運(yùn)的是，創(chuàng)始人發(fā)現(xiàn)聚合物箔可以通過(guò)物理處理來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題，特殊的表面處理ibiTreat誕生了！
ibidi 聚合物蓋玻片的光學(xué)特性
使用帶有聚合物蓋玻片底部的 ibidi 實(shí)驗(yàn)室器具進(jìn)行顯微鏡檢查的科學(xué)家們通常甚至沒(méi)有意識(shí)到它不是由玻璃制成的——僅僅是因?yàn)槟鸁o(wú)法分辨成像質(zhì)量的差異。
那么，這是為什么呢？某些材料特性對(duì)于高質(zhì)量的顯微鏡檢查是必不可少的。我們將仔細(xì)研究其中五個(gè)參數(shù)（蓋玻片厚度、折射率、阿貝數(shù)、透射率和自發(fā)熒光），以及 ibidi 聚合物蓋玻片的規(guī)格與玻璃和傳統(tǒng)聚苯乙烯組織培養(yǎng)容器的比較。
蓋玻片厚度
蓋玻片的厚度在成像質(zhì)量中起著重要作用，因?yàn)榇蠖鄶?shù)顯微鏡物鏡都設(shè)計(jì)為聚焦在具有一定厚度的蓋玻片頂部的樣本上（圖 1）。在細(xì)胞顯微鏡中，標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片厚度為 0.17 mm (170 µm +20/–10 µm)，對(duì)應(yīng)于 #1.5 蓋玻片。雖然大多數(shù)聚苯乙烯組織培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿的底部厚度為 500–1000 µm，但 ibidi 聚合物蓋玻片的厚度與標(biāo)準(zhǔn) #1.5 玻璃蓋玻片的厚度相同。
圖 1：顯微鏡物鏡針對(duì) 170 µm 的標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片厚度進(jìn)行了優(yōu)化（左）。使用其他蓋玻片厚度高分辨率物鏡無(wú)法聚焦在樣品上（右）。
折射率
ibidi 聚合物蓋玻片的折射率（測(cè)量特定材料內(nèi)的光速）為 1.52，因此與玻璃的折射率相同。相比之下，由聚苯乙烯制成的標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿的折射率為 1.58。這個(gè)值很重要，因?yàn)轱@微鏡物鏡是為折射率為 1.52 的蓋玻片設(shè)計(jì)的。
透光率
為了提供高質(zhì)量的成像結(jié)果，顯微鏡載體的傳輸能力必須在各種不同的波長(zhǎng)上都很高。玻璃和 ibidi 聚合物蓋玻片就是這種情況。標(biāo)準(zhǔn)聚苯乙烯材料會(huì)阻擋紫外線，這使得它們并不真正適用于所有顯微鏡技術(shù)和熒光團(tuán)（圖 2）
圖 2：各種蓋玻片和細(xì)胞培養(yǎng)材料在不同波長(zhǎng)下的透射曲線。
自發(fā)熒光
顯微鏡載體材料的自發(fā)熒光特性可以通過(guò)在顯微鏡下顯示為高背景信號(hào)來(lái)干擾成像過(guò)程。雖然 ibidi 聚合物蓋玻片材料和玻璃的自發(fā)熒光非常低，但由聚苯乙烯制成的培養(yǎng)皿具有非常高的自發(fā)熒光（圖 3）。
圖 3：不同蓋玻片和細(xì)胞培養(yǎng)材料在不同波長(zhǎng)下的自發(fā)熒光強(qiáng)度。
ibidi聚合物蓋玻片的細(xì)胞培養(yǎng)特性
到目前為止，我們已經(jīng)談了很多關(guān)于 ibidi 聚合物蓋玻片的光學(xué)特性以及它如此適合高質(zhì)量成像的原因，但細(xì)胞呢？
他們?cè)谶@個(gè)表面上感覺(jué)舒服嗎？他們喜歡依附并在上面成長(zhǎng)嗎？答案很簡(jiǎn)單，是的！這就是為什么：
表面剛度
首先，塑料比玻璃更柔軟，這使得它的表面彈性更類似于體內(nèi)組織(Discher et al., 2005;）
圖 4：不同組織以及蓋玻片和細(xì)胞培養(yǎng)材料的表面彈性。
組織培養(yǎng)處理
其次，與玻璃相比，塑料的表面可以進(jìn)行修飾，使其更具親水性，這是大多數(shù)貼壁細(xì)胞類型所喜歡的。這種物理表面處理（不是涂層）通常稱為組織培養(yǎng)處理。大多數(shù)用于細(xì)胞培養(yǎng)的塑料容器都是以這種方式修改的。在 ibidi，我們將聚合物蓋玻片的組織培養(yǎng)表面改性稱為“ibiTreat”，它不是蛋白質(zhì)涂層，而是增強(qiáng)細(xì)胞附著的物理表面處理。當(dāng)然，額外的蛋白質(zhì)涂層可以應(yīng)用于未涂層的 ibidi 聚合物蓋玻片或 ibiTreat 版本，而不會(huì)影響光學(xué)質(zhì)量。
透氣性
細(xì)胞喜歡在 ibidi 聚合物蓋玻片上生長(zhǎng)的第三個(gè)原因是其透氣性。這允許通過(guò)整個(gè)底部表面進(jìn)行氣體交換，為細(xì)胞提供新鮮的 O 2并允許 CO 2離開(kāi)細(xì)胞環(huán)境（圖 5）。
圖 5：與玻璃（右）相比，聚合物蓋玻片允許通過(guò)底部表面進(jìn)行氣體交換（左）。
鑒于上述所有原因，ibidi 聚合物蓋玻片結(jié)合了兩方面的優(yōu)點(diǎn)——高分辨率成像的理想光學(xué)和細(xì)胞附著和生長(zhǎng)的最佳表面*。還是不服氣？可立即訂購(gòu)免費(fèi)樣品。
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