有關(guān)更多信息，請關(guān)注我們公眾號(hào)，參閱為什么當(dāng)移除 ibidi Culture-Insert/ibidi插件時(shí)細(xì)胞有時(shí)會(huì)從蓋玻片上脫落？(將在后續(xù)公眾號(hào)中推出)
ibidi 聚合物蓋玻片確實(shí)允許氣體交換。 在 23°C 時(shí)，O2 的滲透性為 153 cm³/ (m² d bar)，CO2 的滲透性為 474 cm³/ (m² d bar)。 這意味著在 1 bar 大氣壓下，每天 153 cm3 O2 可以穿透 1 m2 的 180 µm (+10/-5 µm) 厚聚合物薄膜。
對于 ibidi Stage Top 孵化系統(tǒng)的缺氧實(shí)驗(yàn)，我們建議使用帶有玻璃底部的蓋玻片 ibidi 載玻片，因?yàn)樗鼈儾煌笟狻?/div>
4、細(xì)胞可以在 µ-Slide 18 Well - Flat 中培養(yǎng)多長時(shí)間？
由于 µ-Slide 18 Well-Flat 的開孔結(jié)構(gòu)和使用的物質(zhì)量少，蒸發(fā)率高。 因此，玻片僅推薦用于不超過 48 小時(shí)的短期檢測。
5、是否可以在 µ-Slide 2 Well Co-Culture 的小孔中進(jìn)行獨(dú)立實(shí)驗(yàn)？
不可以，因?yàn)?µ-Slide 2 Well Co-Culture 的小孔之間很有可能會(huì)發(fā)生交叉污染。 但是，可以在兩個(gè)主要孔中進(jìn)行兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)。
6、在 µ-Slide 2 Well Co-Culture 中，細(xì)胞能否穿過孔之間的屏障板？
能， 隨著時(shí)間的推移，運(yùn)動(dòng)細(xì)胞可能會(huì)在 µ-Slide 2 孔共培養(yǎng)中的屏障上移動(dòng)或增殖，尤其是當(dāng)它們以高融合度接種時(shí)。 為避免這種情況，在載玻片表面包被可能會(huì)有所幫助。
7、µ-Slide III 3in1 可以通過 ibidi 流體剪切力系統(tǒng)進(jìn)行控制嗎？
可以。 通過特殊設(shè)置，可以使用 ibidi 流體剪切力系統(tǒng)完全控制µ-Slide三合一通道培養(yǎng)載玻片。 以這種方式，可以使用層流將載玻片中的貼壁細(xì)胞暴露于交替梯度。 如需了解更多信息請聯(lián)系我們獲得技術(shù)支持。
8、如何防止培養(yǎng)液蒸發(fā)？
根據(jù)孵化條件，少量培養(yǎng)基會(huì)迅速蒸發(fā)，尤其是在長期實(shí)驗(yàn)期間。 此外，所有細(xì)胞培養(yǎng)箱都需要很長時(shí)間才能恢復(fù)濕度，尤其是在打開門之后。 雖然溫度和二氧化碳在幾分鐘內(nèi)恢復(fù)，但完全恢復(fù)濕度可能需要幾個(gè)小時(shí)。
由于這些問題，我們建議使用以下技術(shù)之一來最大程度地減少蒸發(fā)：
?將細(xì)胞培養(yǎng)容器放入裝有濕紙巾的培養(yǎng)皿中。
?用封口膜密封培養(yǎng)容器。
?使用 ibidi 防蒸發(fā)油（例如硅油）。
9、我的 µ-Slides/µ-Dishes 底部有劃痕。 這些是從哪里來的，我該如何預(yù)防？
ibidi 聚合物蓋玻片對機(jī)械刮擦很敏感。 如果在將 ibidi µ-Slide/µ-Dish 直接放在工作臺(tái)上或培養(yǎng)箱內(nèi)時(shí)不加倍小心，它可能會(huì)受到損害。 因此，在顯微鏡下可能會(huì)看到小劃痕。 為避免這種影響，我們建議使用µ-Slide Rack或µ-Dish Rack等保護(hù)底部材料。 該解決方案還允許同時(shí)方便地處理多達(dá)8個(gè)µ-Slide或6個(gè)µ-Dish。
10、如何最小化µ-Plate 24 孔中的彎液面？
彎液面的形成是小型開放孔的固有特性，無法完全避免。
與疏水表面相比，彎液面更容易在親水表面上形成。由于大多數(shù)貼壁細(xì)胞類型不能很好地附著在疏水表面上，ibidi 提供具有親水、組織培養(yǎng)處理表面和最佳細(xì)胞粘附特性的培養(yǎng)容器 ( µ-Plate 24 孔黑色 ID 14 mm ibiTreat，#82426）。然而，在這種情況下，彎液面的形成可能比使用未涂層板時(shí)更突出。
為了減少彎液面的形成，請嘗試使用具有未經(jīng)處理的疏水表面的 µ-Plate 24 Well Black ID 14 mm Uncoated, Hydrophobic (#82421)。當(dāng)充滿水時(shí)，該表面幾乎不會(huì)形成彎液面。然而，細(xì)胞培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)會(huì)附著在孔的表面。一段時(shí)間后，這將形成非共價(jià)單分子涂層，形成親水表面和突出的彎月面。水和緩沖液都不能洗掉蛋白質(zhì)涂層。
為了盡量減少成像過程中的半月板問題并確保細(xì)胞附著，您可以在 µ-Plate 24 Well Black ID 14 mm Uncoated, Hydrophobic 中嘗試以下方案：
? 用結(jié)合蛋白（例如聚-L-賴氨酸或纖連蛋白）包被孔以支持細(xì)胞附著。使用盡可能小的體積以確保只有孔的下部是親水的（例如，0.5–0.8 ml）。小心處理板，使孔的上部不與蛋白質(zhì)溶液接觸。涂敷后，小心地除去溶液。
? 將細(xì)胞接種到 0.5–0.8 ml 培養(yǎng)基中。定期檢查，至少每天一次，看看這個(gè)量是否足以確保您的細(xì)胞存活。如有必要，更換培養(yǎng)基，不要讓孔的上部“濕”。
? 成像時(shí)，用 1.5–2 ml 無蛋白質(zhì)溶液或緩沖液替換培養(yǎng)基。現(xiàn)在，第一步的親水涂層應(yīng)該低于您的填充水平，并且由于孔上部的疏水性，應(yīng)該只會(huì)形成最小的彎液面。
滬公網(wǎng)安備31011202005471 
